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新冠病毒核酸檢測濾光片原理是怎么樣的?

2020-03-26 15:04:24 NMOT

目前的新冠病毒核酸檢測試劑盒,多數(shù)釆用熒光定量PCR檢測法。檢測原理是用病毒獨(dú)特的基因序列委檢測靶標(biāo),通過PCR擴(kuò)增,然后我們的選擇這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級增加,每一個擴(kuò)增出來的DNA序列,都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生特定的熒光信號,擴(kuò)增出來的靶基因越多,累計(jì)的熒光信號就越強(qiáng)。然后PCR檢測儀里面的特殊波段的光學(xué)濾光片過濾掉噪音之后捕捉特定的新冠病毒熒光信號,所以,新冠病毒核酸檢測,其實(shí)就是通過生物PCR儀器檢測特定的光信號的累積來確定樣本中否存在新冠病毒核酸。


熒光定量PCR檢測法又稱 qPCR,隨著生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,qPCR技術(shù)已經(jīng)成為實(shí)驗(yàn)室最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一。熒光定量 PCR 熒光為基礎(chǔ)對核酸進(jìn)行定量分析,其應(yīng)用非常廣泛,qPCR(Real-time PCR、Real-time quantitative PCR、實(shí)時(shí)熒光定量) 技術(shù),是指在反應(yīng)體系中加入熒光染料,利用熒光信號積累,實(shí)時(shí)監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。qPCR以其特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、反應(yīng)速度快、定量準(zhǔn)確、全封閉反應(yīng)、自動化程度高等特點(diǎn),成為國際公認(rèn)的核酸分子定量的標(biāo)準(zhǔn)方法,受到越來越多科研工作者的青睞。

新冠病毒SARS-CoV-2的檢測采用的是一種應(yīng)用非常廣泛的核酸檢測手段、被稱為金標(biāo)準(zhǔn)的即時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)。qPCR技術(shù)經(jīng)常被用來檢測HIV病毒、乙肝病毒等病原體。qPCR 的主要工作原理就是通過只對特定病毒有效的試劑制造大量的病毒核酸鏡像,從而檢測這種病毒是否出現(xiàn)在樣本,比如病人的鼻腔分泌物。核酸檢測的準(zhǔn)確率離不開高質(zhì)量的試劑盒與其相互匹配的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀儀器,

不是只有試劑盒就能進(jìn)行有效的核酸檢測了,而事實(shí)上新冠病毒核酸檢測,必須依賴核酸檢測試劑和qPCR儀器設(shè)備的相互配合。打比方我們要想打印出一份文件,必須打印機(jī)本體(qPCR儀器)和墨盒(核酸檢測試劑盒)、打印紙張同時(shí)具備才可完成。


濾光片可適配熒光染料有:FAM、SYBR GreenⅠ;VIC、HEX、TET、JOE、TAMRA、CY3 ;ROX、Texas-Red;Cy5 、Quasar-670;Cy5.5、Quasar-705等


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